Karakterisering av NK-reseptorer og kjemokinreseptorer i αβ NKT-celler og γδ NKT-celler
Master thesis
Permanent lenke
https://hdl.handle.net/10642/218Utgivelsesdato
2009-05Metadata
Vis full innførselSamlinger
Sammendrag
NKT (Natural Killer T) celler er en undergruppe av T-celler som har egenskaper til felles med bådeNK (Natural Killer)-celler og konvensjonelle T-celler. De uttrykker både T-cellereseptor (TCR) ogNK-cellemarkører. T-cellereseptoren uttrykkes som en heterodimer med enten en α- og en β-kjedeeller en γ- og en δ-kjede. Konvensjonelle T-celler regnes til det adaptive immunforsvaret, mens NKTcellerfungerer som en celle i det medfødte immunforsvaret. Dette skyldes at de har en rask respons påstimulering av T-cellereseptoren ved å produsere store mengder cytokiner. De er helt unike blantlymfocytter ved at de nærmest eksplosivt frigjør IL-4. NKT-celler kan også ha cytotoksisk aktivitetsom vi ser hos NK-celler.Mekanismene for NKT-celleaktivering og immunregulering er ikke klarlagt, men det ser ut til at NKTcellerer involvert i immunreguleringen av en rekke patologiske tilstander.De fleste studiene av NKT-celler er gjort i mus. En rekke sykdomsassosierte humane gener harhomologer i rottegenomet. Det er derfor viktig å også ha kunnskap om rotte NKT-celler. Man vet i dagsvært lite om NKT-celler i rotte, og vi har derfor gjort en kartlegging av rotte NKT-cellers uttrykk avNK-cellereseptorer og kjemokinreseptorer. I rotte defineres NKT-celler av NK-reseptoren NKR-P1A,i kombinasjon med enten αβTCR eller γδTCR.Vi har sortert ut αβNKT- og γδNKT-celler fra rottemilt og studert de to populasjonene med hensyn pået repertoar av NK-reseptorer og kjemokinreseptorer. Utrykket av de ulike reseptorene er studert påmRNA-nivå ved hjelp av RT-PCR og på proteinnivå ved bruk av flowcytometri. Vi fantsammenfallende uttrykk av NK-reseptorer på de to gruppene av NKT-celler, mens det var enkelteulikheter i uttrykk av kjemokinreseptorer som kan ha betydning for in vivo distribusjon av cellene. NKT (Natural Killer T) cells is a subpopulation of T-cells that share some characteristics with bothNK (Natural Killer) -cells and conventional T-cells. They express both the T-cell receptors (TCR) andNK-cell markers. The T-cell receptor is expressed as a heterodimer consisting of either an α- and a β-chain or a γ- and a δ-chain. Conventional T cells are a part of the adaptive immune system, whereasNKT cells function as cells in the non-adaptive immune system. They respond quickly to T-cellreceptor stimulation by producing high amounts of cytokines. NKT cells are quite unique amonglymphocytes due to their almost explosive release of IL-4. NKT cells do also show cytotoxic activitysimilar to NK cells.The mechanisms for NKT cell activation and immune regulation are not fully understood, but it seemsthat NKT-cells are implicated in the regulation of several pathological conditions. Most studies ofNKT cells are done in mouse models. Many human genes associated to disease have homologues inthe rat genome. To have knowledge of rat NKT cells is therefore of great importance. Up till now, theknowledge of rat NKT cells is quite limited. To take this knowledge a step further, we have done aphenotypic survey of rat NKT cells with regard to NK receptors and chemokine receptors. In the rat,NKT cells are defined by the NK receptor NKR-P1A in combination with αβTCR or γδTCR.We have sorted out αβNKT cells and γδNKT cells from rat spleen, and studied a repertoire of NKreceptors and chemokine receptors on both subsets. The receptor expression was studied at the mRNAlevel with RT-PCR, and at the protein level by flowcytometri. We found that the expression of NKreceptors where quite similar for the two subsets, whereas there were some differences in chemokinereceptor expression that may indicate differential localization in vivo.
Beskrivelse
Master i biomedisin
Utgiver
Høgskolen i Oslo. Avdeling for helsefagRikshospitalet. Immunologisk Institutt