| dc.description.abstract | Sammendrag Innledning: I det siste har det vært stor fokus på sammenheng mellom tarmflora og etiologien av metabolske sykdommer som fedme og type 2-diabetes. Tarmflora kan spille en viktig rolle i energimetabolisme ved blant annet fermentering av ufordøyelige bestanddeler fra kosten og dermed produsere kortkjedede fettsyrer (SCFA) som acetat, butyrat og propionat. Disse fettsyrene kan transporteres over tarmveggen til blodbanen og ha direkte effekter på blant annet metabolisme i perifere vev. Forgreinede fettsyrer (BCFA) er nylig blitt sett på som bioaktive molekyler som bidrar med positive helseeffekter forbundet med inntak av meieriprodukter, men man vet veldig lite om mulige effekter på energimetabolisme i skjelettmuskel. Skjelettmuskel kan være et viktig virkningsområdet for kortkjedede og forgreinede fettsyrer som er lite forsket på. Metoder: Satelittceller ble isolert fra muskelbiopsier tatt fra lårmuskulaturen (m. vastus lateralis) til friske frivillige donorer. Muskelcellene ble dyrket opp, proliferert og differensiert til flerkjernede myotuber. Under differensieringsperioden ble cellene forbehandles med kortkjedede fettsyrer som acetat, butyrat og propionat, og forgreinede fettsyrer som 12-metyltetradekansyre (12-MTA), 13-metyltetradekansyre (13-MTA), 15-metylheksadekansyre (15-MHA). Glukose- og oljesyremetabolisme ble undersøkt ved bruk av substratoksidasjonsmetode, der radiomerket D-[14C(U)] glukose og [1-14C] oljesyre ble benyttet. Genuttrykk av utvalgte gener som CYC1, UQCRB, GLUT1, CPT1B og CD36 ble undersøkt ved å benytte revers-transkriptase kvantitativ polymerase-kjedereaksjon (RT-qPCR). Effekt av kortkjedede og forgreinede fettsyrer på interleukin-6 (IL-6) sekresjon ble studert ved bruk av ELISA (Enzym-Linked Immunosorbent Assay). Proteinsyntese i skjelettmuskelceller ble studert ved å undersøke 14C-leucin-inkorporering i proteiner. Tynnsjiktkromatografi (TLC) ble brukt for å undersøke inkorporering av 14C-leucin inn i varierte lipidklasser etter forbehandling med butyrat og BCFA. Resultater/konklusjon: Resultatene viste økt oljesyremetabolisme og glukoseopptak etter 24 timers forbehandling med butyrat 100 μM. Når det gjelder forgreinede fettsyrer så var det 12-MTA som viste effekt på glukoseopptak uten å ha noe effekt på verken glukoseoksidasjon eller oljesyremetabolisme. Kortkjedede og forgreinede fettsyrer hadde ingen effekt på verken proteinsyntese eller sekresjon av interleukin- 6 (IL-6) fra skjelettmuskelceller. Disse fettsyrer påvirket heller ikke uttrykk av utvalgte, relevante gener involvert i energimetabolisme. Forgreinede fettsyrer, særlig 12-MTA og 13-MTA hadde effekt på inkorporering av 14C-leucin i cellulære lipider i skjelettmuskelceller. Abstract Introduction: The connection between the gut microbiota and the aethiology of metabolic diseases as obesity and type 2-diabetes is increasingly being recognized. The gut microbiota might affect energy metabolism by fermenting indigestible dietary components and thereby producing short chain fatty acids (SCFA) as acetate, butyrate and propionate. These SCFA might enter the systemic circulation and directly affect metabolism of peripheral tissues. Branched chain fatty acid (BCFA) have recently been proposed as bioactive molecules contributing to the positive health effects associated with consumption of dairy products, but very little is known about possible effects on energy metabolism in skeletal muscle. Skeletal muscle might be an important site of action of SCFA and BCFA, yet relatively unexplored. Methods: Satellite cells were isolated from muscle biopsies taken from musculus vastus lateralis from healthy voluntarily donors. The cells were cultured, proliferated and differentiated into multinuclear myotubes. During differentiation, the cells were pretreated with SCFA (acetate, butyrate and propionate) and BCFA (12-methyltetradecanic acid, 13-methyltetradecanic acid and 15-methylhexadeconate acid). Glucose and lipid metabolism was studied using radiolabeled D-[14C(U)] glucose and [1-14C] oleic acid in substrate oxidation method. Gene expression of selected genes such as CYC1, UQCRB, GLUT1, CPT1B and CD36 were examined using reverse-transcriptase quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR). Effect of SCFA and BCFA on interleukine-6 (IL-6) secretion was examined by using ELISA (Enzym-Linked Immunosorbent Assay). 14C-leucine incorporation in proteins was used to study protein synthesis in skeletal muscle cells. Thin layer chromatography (TLC) was used to investigate the incorporation of 14C-leucine into different cellular lipids after pretreatment with butyrate and BCFA. Results/conclusion: The results showed increased oleic acid metabolism and glucose uptake in skeletal muscle cells after 24 hours pretreatment with butyrate 100 μM. As for BCFA, 12-MTA showed effect on glucose uptake without showing any effects on either glucose oxidation or oleic acid metabolism. SCFA and BCFA had no effects on either protein synthesis or IL-6 secretion from skeletal muscle cells. These fatty acid did not affect the expression of selected gene that are involved in energy metabolism. BCFA, especially 12-MTA and 13-MTA had an effect on incorporation of 14C-leucine into cellular lipids in skeletal muscle cells. | en_US |
